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當(dāng)前位置:首頁(yè)  >  技術(shù)文章

  • 2025

    4-14

    摘要研究通過(guò)電穿孔法將攜帶周期型馬來(lái)絲蟲(chóng)基因的重組質(zhì)粒導(dǎo)入哺乳動(dòng)物細(xì)胞,利用某試劑抗生素篩選獲得穩(wěn)定轉(zhuǎn)染單克隆株。經(jīng)威尼德分子雜交儀檢測(cè)基因整合,qPCR及Westernblot驗(yàn)證表達(dá)水平,結(jié)合威尼德紫外交聯(lián)儀分析蛋白修飾。結(jié)果顯示,目標(biāo)基因在細(xì)胞中呈現(xiàn)穩(wěn)定周期性表達(dá),晝夜節(jié)律振幅達(dá)3.8倍,為絲蟲(chóng)生物鐘機(jī)制研究提供了可重復(fù)的體外模型。引言馬來(lái)絲蟲(chóng)(Brugiamalayi)作為淋巴絲蟲(chóng)病的主要病原體,其生命周期受宿主生物鐘調(diào)控的現(xiàn)象已引起廣泛關(guān)注。近年研究發(fā)現(xiàn),絲蟲(chóng)體內(nèi)存...

  • 2025

    4-14

    摘要TRAIL基因轉(zhuǎn)染至神經(jīng)干細(xì)胞,評(píng)估其對(duì)腫瘤細(xì)胞的靶向殺傷效應(yīng)。利用威尼德電穿孔儀完成基因轉(zhuǎn)染,采用某試劑進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)及功能驗(yàn)證。體外實(shí)驗(yàn)顯示,轉(zhuǎn)染后神經(jīng)干細(xì)胞高表達(dá)TRAIL蛋白,顯著誘導(dǎo)膠質(zhì)瘤細(xì)胞凋亡;體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證實(shí)其可抑制裸鼠移植瘤生長(zhǎng)。結(jié)果表明,神經(jīng)干細(xì)胞攜帶TRAIL基因具備潛在抗腫瘤應(yīng)用價(jià)值。引言腫瘤的靶向治療是當(dāng)前研究熱點(diǎn),傳統(tǒng)化療及放療因缺乏特異性易損傷正常組織。TRAIL(腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體)可選擇性誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡,但其半衰期短、全身毒性限制臨...

  • 2025

    4-14

    摘要研究通過(guò)構(gòu)建bFGF基因表達(dá)載體,采用威尼德電穿孔儀對(duì)骨髓基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行基因轉(zhuǎn)染,探討其表達(dá)效率及生物學(xué)功能。實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了轉(zhuǎn)染條件,并通過(guò)Westernblot和免疫熒光技術(shù)檢測(cè)蛋白表達(dá)水平。結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染后細(xì)胞中bFGF蛋白顯著上調(diào),且細(xì)胞增殖活性增強(qiáng)。該研究為基于基因修飾的骨再生治療提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。引言堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)是調(diào)控細(xì)胞增殖、分化和組織修復(fù)的關(guān)鍵因子,其在骨代謝中的作用備受關(guān)注。骨髓基質(zhì)細(xì)胞(BMSCs)具有多向分化潛能,是骨組織工程的重要種子細(xì)...

  • 2025

    4-14

    摘要酪氨酸羥化酶(TH)基因的重組質(zhì)粒,利用威尼德電穿孔儀將其轉(zhuǎn)染至神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs),探討TH基因在NSCs中的表達(dá)效率及對(duì)多巴胺能分化的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染后細(xì)胞TH蛋白表達(dá)顯著升高,且分化后多巴胺能神經(jīng)元標(biāo)志物陽(yáng)性率增加。結(jié)果表明,TH基因轉(zhuǎn)染可有效促進(jìn)NSCs向多巴胺能方向分化,為神經(jīng)退行性疾病的細(xì)胞治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。引言神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs)因其自我更新和多向分化潛能,成為再生醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。酪氨酸羥化酶(TH)作為多巴胺合成的限速酶,其表達(dá)水平直接影響...

  • 2025

    4-3

    選擇適合植物原生質(zhì)體電穿孔實(shí)驗(yàn)的電穿孔儀,需要考慮以下幾個(gè)方面:1.電穿孔儀的類型:雙波全能型電穿孔儀:威尼德的雙波全能型電穿孔儀等,結(jié)合了指數(shù)波和方波的優(yōu)點(diǎn),具有更廣泛的適用性和靈活性,可根據(jù)不同植物原生質(zhì)體的特性和實(shí)驗(yàn)需求,選擇合適的波型和參數(shù),是進(jìn)行植物原生質(zhì)體電穿孔實(shí)驗(yàn)的理想選擇之一。2.參數(shù)設(shè)置范圍:電壓調(diào)節(jié)范圍:植物原生質(zhì)體電穿孔實(shí)驗(yàn)通常需要較高的電壓,一般在1003000V之間。脈沖持續(xù)時(shí)間:脈沖持續(xù)時(shí)間一般在1μs10ms之間。較短的脈沖適用于對(duì)電場(chǎng)敏感的植物...

  • 2025

    3-26

    摘要分子克隆技術(shù)構(gòu)建了RAB5A基因的真核表達(dá)載體,并驗(yàn)證其功能。利用威尼德電穿孔儀將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至HEK293T細(xì)胞,通過(guò)熒光顯微觀察和Westernblot檢測(cè)RAB5A蛋白表達(dá)。結(jié)果表明,載體成功定向克隆RAB5A基因,并在真核細(xì)胞中高效表達(dá),為后續(xù)研究RAB5A的細(xì)胞功能奠定基礎(chǔ)。引言RAB5A是調(diào)控早期內(nèi)吞體運(yùn)輸?shù)年P(guān)鍵小GTP酶,其功能異常與腫瘤轉(zhuǎn)移、神經(jīng)退行性疾病密切相關(guān)。目前,針對(duì)RAB5A的研究多依賴瞬時(shí)表達(dá)系統(tǒng),但穩(wěn)定表達(dá)載體的缺乏限制了其功能分析的深度。定...

  • 2025

    3-26

    摘要內(nèi)蒙株細(xì)粒棘球蚴抗原基因Eg95為靶點(diǎn),通過(guò)分子克隆技術(shù)構(gòu)建真核表達(dá)載體,利用威尼德電穿孔儀轉(zhuǎn)染HEK293T細(xì)胞,驗(yàn)證抗原蛋白表達(dá)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,核酸疫苗可誘導(dǎo)小鼠產(chǎn)生特異性抗體及Th1型免疫應(yīng)答,為包蟲(chóng)病防控提供新策略。引言細(xì)粒棘球蚴?。倚桶x(chóng)病)是人畜共患寄生蟲(chóng)病,流行于畜牧區(qū),嚴(yán)重威脅公共衛(wèi)生安全。傳統(tǒng)疫苗研發(fā)多依賴重組蛋白或滅活病原體,存在成本高、免疫原性不足等局限。核酸疫苗通過(guò)遞送抗原基因至宿主細(xì)胞,直接表達(dá)靶蛋白,可激活細(xì)胞與體液免疫雙重應(yīng)答,具有高效、安...

  • 2025

    3-26

    摘要探究真核細(xì)胞中牙周炎基因疫苗的表達(dá)特性。通過(guò)構(gòu)建攜帶牙周炎相關(guān)抗原基因的重組質(zhì)粒,利用威尼德電穿孔儀轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞,結(jié)合熒光定量PCR、Westernblot及流式細(xì)胞術(shù)分析基因表達(dá)效率與蛋白定位。實(shí)驗(yàn)表明,疫苗在真核細(xì)胞中高效表達(dá),且誘導(dǎo)特異性免疫應(yīng)答。結(jié)果為牙周炎基因疫苗開(kāi)發(fā)提供理論支持。引言牙周炎是一種由菌斑生物膜引發(fā)的慢性炎癥性疾病,傳統(tǒng)治療手段存在局限性?;蛞呙缤ㄟ^(guò)遞送抗原編碼基因,激發(fā)宿主免疫反應(yīng),具有高效、持久的潛力。然而,真核細(xì)胞中基因疫苗的表達(dá)效率及調(diào)控...

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